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  • 選擇紫外分光光度計要考慮的因素有哪些
    點(diǎn)擊次數:1792 更新時(shí)間:2019-03-27 打印本頁(yè)面 返回
       選擇紫外分光光度計要考慮的因素有哪些
      紫外分光光度計,是實(shí)驗室普及率很高的一種光譜儀器,由于靈敏度高、選擇性好、準確度高、適用濃度范圍廣,而且分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速得到廣泛的應用,長(cháng)期在分析領(lǐng)域扮演很重要的角色。在選擇這類(lèi)儀器時(shí)要考慮哪些因素呢
      1、光學(xué)構造
      一般來(lái)說(shuō),紫外光分光光度計分為單光束和雙光束兩類(lèi)。顧名思義,單光束型主要是依賴(lài)單束光進(jìn)行測量。一束給定波長(cháng)的光通過(guò)對照物,然后再通過(guò)實(shí)際樣品溶液,就能得到吸光結果。
      雙光束型則是通過(guò)一個(gè)斬光輪將一束光分成兩束,分別測量對照樣品和實(shí)際樣品??梢孕』馄坪蜏p少測量時(shí)間。一些雙光型光度計不利用斬光輪,而是利用一種光束分光器來(lái)代替,將一束光分成兩束平行的光然后同時(shí)測量對照樣品和目的樣品。因為增加了測量的速度,所以雙光束分光光度計在測量一些溶液隨時(shí)間動(dòng)態(tài)變化的研究中大有用處。
      2、光源和檢測方法
      分光光度計的光譜也是需要考慮的一個(gè)重要因素。實(shí)驗室研究人員希望省錢(qián)購入專(zhuān)門(mén)儀器定量核酸、蛋白或者細菌的生長(cháng)情況。
      紫外分光光度計一般覆蓋190nm和380nm波長(cháng),通常利用氘燈照明。一些特殊的儀器可以提供滿(mǎn)足光子學(xué)和半導體研究需要的光譜范圍。
      一些儀器具有多種光源供選擇:紫外光、可見(jiàn)光和甚至紅外光(780 nm 至3,000 nm)。鎢燈和鹵素燈一般只覆蓋可見(jiàn)光部分(大約380 nm 到800 nm)。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見(jiàn)光區域。
      分光光度計的帶寬很大程度上依賴(lài)于單色儀的狹縫的寬度??梢酝渡涑鰧?shí)驗要求的光譜。一種嚴格帶寬使得儀器能對復雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測量??勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺分光光度計滿(mǎn)足多種實(shí)驗需要。
      為了測量吸光值,分光光度計制造商通常使用光電倍增管和光敏二極管。PMTs提供快速的反應時(shí)間和良好的靈敏度,并且可以在紫外光譜調節至特定的范圍。但一些制造商依賴(lài)于光敏二極管的動(dòng)態(tài)范圍在數秒內行使所有的光譜測量。
      3、樣品類(lèi)型
      在大部分的樣品類(lèi)型中,分光光度計可接受樣品孔、小玻璃管、吸漿管和微孔板。微孔板主要是滿(mǎn)足高通量的需要和大規模的實(shí)驗室需求。但盡管對于小實(shí)驗室來(lái)說(shuō),制造商仍然提供了多種容器轉換器來(lái)滿(mǎn)足通量的要求和減少實(shí)驗時(shí)間。
      用小試管裝樣品容量一般從1 μl-5ml,并且一些儀器裝備了各種樣品固定物來(lái)滿(mǎn)足各種改變需要。體現了柔韌性。
      4、數據管理
      大部分單機型的分光光度計包含了驅動(dòng)儀器運行和管理數據的軟件。高性能的儀器,通常與PC機一起聯(lián)用,需要從制造商提供額外的軟件。同時(shí)用戶(hù)也可以選擇升級軟件以滿(mǎn)足他們的需要。
      另外一個(gè)值得考慮的因素是數據的終使用。各獨立實(shí)驗室都有各自感興趣的實(shí)驗結果。例如一些藥物機構需要考慮美國FDA的要求和歐聯(lián)盟的藥物評價(jià)機構的要求選擇不同的數據處理方式。
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